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櫻花OCT包埋劑在速凍中的應用
更新時(shí)間:2023-02-27   點(diǎn)擊次數:2766次
  櫻花OCT包埋劑在速凍中的應用 
  櫻花OCT包埋劑是對冷凍切片質(zhì)量一重要影響因素,包埋劑用量要適宜,過(guò)多或過(guò)少都會(huì )影響標本冷凍質(zhì)量。常用的有三種包埋劑OCT劑、B超藕合劑以及普通膠水。B超藕合劑適用于細胞豐富質(zhì)地較嫩的組織,普通膠水或OCT劑適用于纖維豐富質(zhì)地偏硬組織。(OCT包埋劑驟冷時(shí)固化,其冷凍速度和軟硬韌度與組織相近,其還具有水溶性,不影響染色等優(yōu)點(diǎn)。)
  當切片時(shí),如果發(fā)現冰凍過(guò)度時(shí),可將冰凍的組織連同支承器取出來(lái),在室溫停留片刻,再行切片,或者用口中哈氣,或者用大拇指按壓組織塊,以此來(lái)軟化組織,再行切片。另者,調高冰凍點(diǎn)。
  解剖之后迅速取出所需的新鮮組織,用干紗布或濾紙擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形狀不一的空泡,使細胞內結構移位。
  取材中目的標本既要明確也要確保其結構的完整性,應避免不必要的脂肪及壞死組織附著(zhù);要盡量剔除毛發(fā)、硬骨或鈣化物;保乳手術(shù)切緣由于脂肪組織較多,取材厚度不要超過(guò)3mm,厚者冰凍費時(shí),大者難以切完整。甲狀腺及淋巴結組織要帶全組織被膜并除去多余的脂肪組織。
  速凍:
  1、將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(直徑約2cm)。
  2、如組織塊小可適量加櫻花OCT包埋劑浸沒(méi)組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內。
  3、當盒底部接觸液氮時(shí)即開(kāi)始氣化沸騰,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10-20s組織即迅速冰結成塊。
  4、在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。
  5、若需要保存,應快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存備用。
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