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原代破骨細胞前體細胞轉染操作步驟在已經(jīng)發(fā)表文章中的經(jīng)驗分享
更新時(shí)間:2021-07-22   點(diǎn)擊次數:1403次

原代破骨細胞前體細胞轉染操作步驟在已經(jīng)發(fā)表文章中的經(jīng)驗分享介紹


西部戰區總醫院藥學(xué)部,在2021年發(fā)表文章到Cell Communication and Signaling的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國invigentech轉染試劑,高效率轉染原代破骨細胞前體細胞(Osteoclast precursor cells),具體轉染原代破骨細胞前體細胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉染實(shí)驗中使用的細胞數量、試劑用量和操作方法不適用于傳統lipo3000轉染試劑或類(lèi)似產(chǎn)品)。

Cell culture

Sorted primary CD115(+) precursors were cultured in α-minimal essential medium (MEM) containing 10% FBS,1% penicillin-streptomycin solution and 50 ng ml? 1 colony stimulating factor (M-CSF, Abcam). After 3 days,the medium was replaced with fresh medium. LA was added at a concentration of 100 μg/ml to stimulate the precursors. To inhibit the expression of Cadherin-11, the primary osteoclast precursors were transfected with Cadherin-11 siRNA using INVI DNA RNA Transfection reagent (Invigentech) for 24 h. The sequence of Cadherin-11 siRNA was CCAATGGACCAAGATTTAT. In some experiments, primary cells were treated with BYL719 (2.5 μM), GSK690693 (25 nM), 66615 (50 nM), rapamycin (20 μM), or AMG-487 (30 μM).

圖片2.png


Invigentech.英克: 簡(jiǎn)介

美國 Invigentech(英克)公司是開(kāi)發(fā)用于細胞培養的胎牛血清、細胞活力檢測、細胞篩選、細胞支原體清除、細胞轉染和組織再生的新型血清替代品;提供inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品用于支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù);INVI DNA  RNA Transfection Reagent為原代細胞、懸浮細胞、小動(dòng)物活體轉染提供高品質(zhì)轉染試劑;此外我們引進(jìn)的新設施可生產(chǎn)高純度注射用水和生物處理解決方案,用于滿(mǎn)足任何細胞、科研和企業(yè)客戶(hù)需求,每個(gè)批次胎牛血清、細胞活力檢測、細胞篩選細胞,轉染等產(chǎn)品質(zhì)量的穩定性,以加速安全有效的基于細胞和組織的治療研究、開(kāi)發(fā)和商業(yè)化。



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