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Gibco胎牛血清的四個(gè)制備流程
更新時(shí)間:2021-04-07   點(diǎn)擊次數:1111次
  GIBCO胎牛血清應用在哺乳動(dòng)物細胞培養中;因此,胎牛血清應用很廣泛。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。其中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細胞本身不能合成(稱(chēng)為必需氨基酸),必須由培養液提供。
  Gibco胎牛血清的四個(gè)制備流程:
  1、血清來(lái)源:可從世界各國收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標準。地方當局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說(shuō)明血清質(zhì)量的證明資料:包括收集過(guò)程的全部資料、檢驗結果和交付情況。
  2、血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內)血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標準:低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。
  3、血清的制備:
  a. 超低IgG胎牛血清:通過(guò)親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到低,一般IgG≤5ug/ml,生物學(xué)活性不變。
  b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化酶方法測定)。
  c. γ-射線(xiàn)照射:已經(jīng)證明γ-射線(xiàn)照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個(gè)劑量的γ-射線(xiàn)照射不會(huì )改變血清的理化性質(zhì)和對細胞培養的影響。
  4、除菌過(guò)濾:經(jīng)過(guò)上述處理的粗制血清再經(jīng)過(guò)一系列除菌濾膜過(guò)濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過(guò)三層0.1微米濾膜,其他血清可通過(guò)0.2微米濾膜。
  GIBCO胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的性別、年齡、生理條件和營(yíng)養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。
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